AYX爱游戏,爱游戏体育官方网站,爱游戏体育APP

　　目的观察出生后不同年龄阶段大鼠连合下器SOX2阳性细胞的分布和形态结构的变化。探讨在连合下器中神经干细胞的增殖与分化，从而研究在连合下器中神经干细胞的功能和意义。方法雄性健康SD大鼠，选取4周龄、8周龄、16周龄、24周龄各6只，共24只。麻醉后，经心脏灌注4％多聚甲醛磷酸缓冲液01MOL/L，PH72。常规脱水、浸蜡、包埋，切片后，用免疫组化法检测连合下器处SOX2的表达。1、标本制备将不同年龄阶段组别SD大鼠以水合氯醛03ML/100G麻醉，自升主动脉灌注4％多聚甲醛磷酸盐缓冲液01MOL/L，PH72行前固定，立即取脑，后固定，经脱水，透明，包埋，选取含连合下器部分，石蜡切片机冠状面切片，厚度约为5ΜM，制成石蜡切片。本次实验对实验动物的处置符合动物伦理学要求。2、免疫组织化学染色将上述标本取材中得到的石蜡切片经SOX2免疫组织化学染色，苏木精复染后，中性树胶封片，待干燥后使用OLYMPUSBXUCB光学显微镜观察并照相。3、统计学处理实验结果中所示阳性细胞采用专业图像分析软件IMAGEPROPLUS60测定阳性细胞数，计算阳性率。经SPSS160统计学分析，以P＜005为具有显著性差异。结果SOX2免疫组织化学染色后，切片在光学显微镜下观察可以看到SOX2阳性细胞为胞核着色，连合下器与周围边界清晰，腹侧为室管膜面，室管膜面上可见清晰的界线。室管膜面清晰界线的背侧为无结构均质状结构，无阳性表达，均质状结构的背侧可以看到细胞层，细胞呈圆形或椭圆形，不同年龄阶段连合下器区域阳性细胞形态、分布各异，排列致密。在连合下器背侧边缘处可见丰富血管分布，两侧部多于中央部，血管内皮细胞清晰明显。在显微镜下通过测量得到室管膜细胞大小约为35～65ΜM75～105ΜM。将显微镜下观察得到的图像保存，选取相同位置的横断面，同一倍数，相同面积，采用专业图像分析软件IMAGEPROPLUS60测定阳性细胞数，计算阳性率。4组大鼠阳性率％（X±S，N6）分别为1217±293，5417±449，7633±423，9633±186。经SPSS160分析显示4组组间P＜005，均有显著性差异。结论1、观察发现随年龄的增加，连合下器的细胞层数逐渐减少，均质层逐渐增厚。2、观察发现随年龄的增加，SOX2阳性细胞依次增多，低周龄阳性细胞分布以中央部为主，高周龄逐渐向两侧扩大。